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죽염이 꼭 필요한 분들

의식상승 — Tue, 19 Jul 2011 02:49:09 +0900

1. 담배를 많이 피우시는 분

2. 술을 자주 드시는 분

3. 트랜스지방섭취가 많은 분

4. 인스턴트식품을 위주로 자주 드시는 분

5. 분식을 자주 드시는 분

6. 공해에 자주 노출되시는 분, 몬도가네식 , 아무거나 닥치는 대로 드시는 분, 폭음폭식하시는 분, 식사가 불규칙한 분

7. 오염된 식품을 드시는 분

8. 질병에 시달리는 분 = 변비, 장염, 숙변, 위장병, 복부팽만, 소화불량, 구강염, 중이염, 치주염, 방광염, 요도염, 신장염, 냉병, 각종 염증질환, 기침, 가래, 기관지염치질, 피부병, 안과질환 등등

9. 저항력과 면역력이 떨어지는 분 = 몸이 썩거나 녹는 분들, 냄새 많이 나는 분, 암, 당뇨병, 고혈압, 동맥경화, 고지혈증, 대장암, 유방암, 간암, 폐암, 악성종양

10. 몸이 자주 아픈 분

11. 몸에 한기가 있는 분, 몸에 열독화병이 있는 분

12. 몸에 독소가 많은 분

13. 부정적인 생각을 자주하시는 분, 욕 많이 하는 분, 짜증, 신경질, 스트레스 많이 받는 분, 자주 싸움을 하시는 분, 남탓을 많이 하는 분

14. 어혈이 많은 분, 매를 많이 맞는 분, 온몸이 쑤시고 아픈 분

15. 감기에 자주 걸리는 분

17. 돈이 없어 비싼 보약을 드시지 못하는 분

18. 병으로 부터 영원히 졸업하고 싶은 분

19. 병원이나 약국 가기 싫은 분

20. 특별한 건강법을 행하지 않고도 늘 건강하게 살고 싶은분

21. 장수하시고 싶은 분

22. 게을러서 몸 관리 잘 하기 힘든 분

이런 분들에게 꼭 권장합니다.

좋은 죽염이란?

의식상승 — Thu, 24 Dec 2009 18:34:00 +0900

아래는 해월선생님의 말씀입니다.

"최고의 죽염"이라고 하는것은 다른부분보다 용융기술을 의미합니다.

죽염이 재료선정부터 다양한 변수가 있어서 객관적인 순위를 멕일수가 없지만 용융기술은

잘된 것과 아닌것이 확연하게 구별이 되거든요.

물론, 용융기술이 부족하다고 죽염자체가 나쁜 것은 아닙니다.

간단하게 구별할수있는 방법이죽염의 결정과 투명도입니다.

죽염의 결정에 사각결정이 많고 기포가 없으며

투명도가 높아야 기술이 뛰어난 죽염이라고 할 수가 있습니다.

결정이 좋은것은 같은 조건에서 나쁜것에 비히여 맛이 날카롭습니다.

순하고 단맛이 많이 돈다고 하는것도 같은 조건에서는 불순물이 많을 때 대개 느껴집니다.

대신 순하고 단맛이 많이 돌면서도 뒷맛이 깔끔하다면

아마도 최고수준의 죽염이라고 할 수가 있을것입니다.

그리고 이것이 가장 중요한 포인트인데

불순물이 적을수록 맛은 짠맛이 강해지고 순하지 않고

강한맛이 나면서 뒷맛은 대신 깔끔합니다.

경희대 한의대 김형민 교수님의 기획기사

의식상승 — Tue, 01 Dec 2009 04:02:16 +0900

경희대 한의대 김형민 교수님의 기획기사 1

마늘 죽염이 효소활성화에 미치는 영향

의식상승 — Tue, 01 Dec 2009 04:01:22 +0900

약학회지 제 45권 제 3호 258-268 (2001)
Yakhak Hoeji Vol.45, No.3

마늘 -죽염 제제가 위장 장애 유발 흰쥐의 항산화 효소활성에 미치는 영향

허근 * 김 영희 * 김 대경
영남대학교 약학대학 약리학
(주) 인산가 부설 인산 생명 과학 연구소

＊ 본 논문에 관한 문의는 (전화 02-736-3171 ) (팩스 02-732-3919 )

Protective Effect of an Aged Garlic-bamboo Salt Mixture
on the Rat with the Alcohol-salicylate Induced
Gastropathy

Keun Huh, Young-Hee Kim*, Da-Qing Jin
College of Pharmacy, Yeungnam University, Kyungsan, 712-749
Insan Institute of Biotechnology, Insanga Inc. Seoul, 110-300
Correspondence author: Young-Hee Kim

(Tel) 02-736-3171
(Fax) 02-732-3919

Abstract ― Garlic has been known to be effective against the gastrointestinal diseases which can be induced by production of oxygen-derived free radical. It has been shown that bamboo salt is effective on the treatment and prevention of various gastrointestinal disorders. Bamboo salt is a processed salt invented by a Korean, ll-Hoon Kim. It has been reported that garlic and bamboo-salt are useful to the treatment of gastric disorders in Korea. To clarify the protective mechanism of the garlic-bamboo salt mixture, the gastropathy was induced in rats with alcohol-salicylate and the activities of the free radical scavenging enzymes were examined. In this study, we found that the garlic-bamboo salt mixture reduced the severity of hemorrhagic lesion in gastric mucosa in the rats. In addition, the activities of Superoxide dismutase(SOD), Glutathione Peroxidase(GPx), Glutathione Reductase(GR) were significnatly increased and the total content of GSH was recovered. From these results, we concluded that the protective effect of the garlic-bamboo salt mixture on gastropathy in rats is its ability to recover the level of GSH and to increase the activities of the free radical scavenging enzymes(SOD, GPx, GR).

Key words □ Aged garlic-bamboo salt, alcohol-salicylate, superoxide dismutase, glutathione peroxidase, glutathione reductase, glutathione

위점막 및 위점막의 미세혈관 손상 등의 결과로 오는 위염과 같은 각종 위장 장애에서 장기간 산화성 스트레스에 노출되면 각종 질소군과 반응성산소 (reactive oxygen species:ROS)에 의해서 DNA가 손상을 입고 이것이 적절히 제어되지 못하고 증가하여 중증 장애 상태가 지속될 경우 중요한 위암요인을 제공하게 된다고 하며 , 이때 항산화능을 가진 물질이나 라디칼 포집능을 가진 효소를 활성화시키면 산화적 손상으로 인한 위장질환 등을 방지할 수 있다고 한다 .

일반적으로 oxygen free radical은 세포내 미토콘드리아의 호흡연쇄계 , 마이크로좀의 약물대사 효소계 및 Xanthineoxidase에 의해 생성되어 생체내 친핵성 물질을 공격함으로써 동맥경화증 , 당뇨병 , 암과 염증을 일으키게 되며 스트레스나 NSAID, Helicobactor pylori에 의한 위점막 상해요인의 하나로서도 free radical의 관여가 생각되고 있다

마늘은 공기 중에서 효소에 의해 생리 활성 물질인 알리신으로 변화하는 알리인 등 각종 유황 화합물을 함유하고 있으며 , 이들 성분이 활성산소종에 대항하거나 항산화 작용을 갖는 여러 효소의 효능을 증가시킴으로써 위장 질환시 생성되는 활성산소의 생성을 막아주고 과혈당 , HIV감염세포, 동맥경화 , 암 , 염증질환 , 지질과산화 등을 개선하는 작용을 나타낸다고 알려져 있다 .

마늘의 함유황 성분 중 산화성 스트레스를 유발하는 free radical에 대해 scavenging acitivity를 갖는 성분으로서는 Diallysulfide(DAS), Dipropylsulfide(DPS), Diallyldisulfide(DADS), S-allylcysteine(SAC) 등이 규명되었으며 , 그 중에서도 불포화 sulfur allyl compound가 포화된 sulfur propyl compound보다 활성이 크다고 알려져 있으나 마늘의 항산화 작용은 어느 특정한 성분에 의한 것이 아니라 함유황 성분 (organic sulfur compounds; OSCs)들의 여러 단계 물질들이 관여해서 나타내는 작용으로 보고 되었다.

또한 죽염은 한국 전래 민간약의 일종으로 대나무에 천일염을 넣고 한 두 번 구워서 소화불량, 복통 , 치통에 사용해 오던 것으로 약소금 혹은 대소금이라 불리던 구운소금이나 , 김일훈 선생은 죽염제조법을 개선 확립함으로써 제독 , 법제된 가공염을 제조하였다 . 죽염의 조성은 천일염과 비슷하나 금속원소 중 K, Ca, Fe, Zn, Mn의 함량이 높아져 있고 , 중금속 원소는 검출되지 않으며 pH는 10.0 부근으로서 알카리성을 띠고 있는 물질이다 .

민간에서는 위염 , 위산과다 , 위궤양 , 위암 치료에 마늘과 함께 사용하며, 구내염 , 치통 , 설암 , 구강암 등 구강질환 치료에도 쓰이며 축농증, 중이염 , 초기염증성 안과질환 , 알러지 질환치료에도 사용하고 있다

그러나 양 등은 죽염에 관한 약리작용 평가에서 동물 모델을 사용한 기초 실험시 항암 , 항고혈압 , 항 당뇨 효과를 나타내지 않았다고 보고 하였으며 김 등도 죽염의 항 궤양효과를 기대하기 어렵다고 보고 하였다 .

죽염은 활발한 상품화가 이루어질 만큼 구강질환 예방과 치료작용은 인정을 받고 있으며 , 손 등은 치은염 , 치아우식증 예방에 죽염이 효과를 나타낸다고 보고 했다. 또 죽염은 위장관 계통에도 효과가 있다는 임상적 보고가 있었으며, 그 기전은 위염유발 동물의 위조직내에 PGE₂ 생산억제를 개선하고 MDA, TXB₂생산증가를 저지하며 SOD, GSH 등 free radical scavenging enzyme량의 감소를 회복시켜 염증질환 상태를 개선한다고 보고 되었다.

죽염의 물리 화학적 특성을 천일염과 비교한 연구에서 죽염은 해리도 , 전기전도도 , 자기화율이 천일염에 비해 낮고 , 이온결합 격자크기도 순수 NaCl의 1/6∼1/10로 작으며 , 준 안정상태의 에너지를 갖고 있다고 보고되었다 .

마늘 속의 함유황 성분이 free radical scavenging능을 통한 항산화작용과 죽염의 소화기계 염증개선 작용을 가지고 있는 것으로 알려졌으므로 마늘과 죽염을 2：1로 혼합한 제재를 구입하고 , 알콜과 NSAID로 위염을 유발한 동물 모델을 만든 후

이 실험동물에 대해 마늘 -죽염제재의 위염에 대한 free radical scavenging기구와 관련된 효소의 활성에 미치는 효과를 측정하였으며 , 두 물질의 혼합제재가 나타내는 치료 , 예방 , 방어기전을 밝히고자 하였다 .

실험재료 및 방법

시약 및 기기

Bovine serum albumin(BSA), NADPH(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate), GSH(reduced & oxydized form of glutathione), TBA(thiobarbituric acid sodium salt), SOS(sodium dodecyl sulfate), Sodium salicylate, TCA(trichloro acetic acid), EDTA, DTNB(5,5' -dithiobis 2-nitro benzoic acid), Sulfo salicylic acid, GR(glutathione reductase), Triethanol amine, Tris-buffer, H2 O2 , Cytochrome C, KH2 PO4 , K2 HPO4 , 2-Vinyl pyridine, Absolute ethanol 등은 Sigma사로부터 구입했으며 Aged garlic-bamboo salt mixture(2:1)는

(주)인산가 제품을 구입해서 사용하였다 . 이 제품은 쪽이 자잘한 밭마늘을 겉껍질 및 속껍질을 제거하고 수세한 후 180 에서 40분간 은은히 구워 75∼85 에서 10시간 건조시킨 후 200메쉬 체로 걸러 분말로 한 마늘가루 2분량에 죽염제조법 47) 에 따라 제조한 9회 죽염 1분량을 결합제 등 일체 부형제를 사용하지 아니하고 강타 , 성형한 정제이다 .

실험에 사용한 기기로는 UV spectrophotometer(SHIMAZU UV-120), Refrigerated centrifuge(Hanil supra 22K), Ultracentrifuge(Hitachi70P-72)등을 사용하였다 .

위장 장애 동물 모델처치 및 위장 손상 정도 측정

1) 실험동물

실험동물은 오전 7시에 점등되며 오후 7시에 소등되는 실내온도 20 2 및 적정 습도를 유지하는 조건에서 사육한 외관상 건강한 체중 250g 내외의 웅성 흰쥐를 사용하였다. 공시험군 (control), 위장장애군 (gastropathy), 치료군 (treatment 1)의 Exp. A 또는 공시험군 (control), 위장장애군 (gastropathy), 방어군 (treatment 2), 예방군 (treatment 3)의 Exp. B로 나누고 매 group당 6마리의 동물을 사육하였으며 12일에 걸쳐 실험하였다 .

2) 동물 모델의 제작

Exp. A의 위장장애군은 ethyl alcohol 4㎖/kg 과 sodium salicylate 200mg/kg을 매일 동일한 시간에 1일 1회 7일간 강제 경구 투여하여 위장장애를 유발한 후 5일간 saline을 동일조건으로 공급하며 자연치유로 인한 실험오차를 배제하였다 . Treatment 1은 위와 동일한 방법으로 alc-salicylate 7일간의 투여로 위장장애를 유발한 후 5일 간 마늘 -죽염 혼합제제의 수성 현탁액을 용시 혼화 , 제조하여 200㎎/kg되게 1일 1회 강제 경구 투여하였으며, 공시험군은 12일간 saline만을 투여하였다 .

Exp. B에 속한 위장장애군은 먼저 saline을 5일간 지속 투여 후 alc-salicylate 로 위장장애 유발을 위한 처치를 7일간 지속하였고 방어군 (Treatment 2)은 saline을 5일 투여 후 위장장애 처치 7일과 동시에 마늘 -죽염을 병용 투여하였으며 , 예방군 (Treatment 3)은 먼저 5일간 마늘 -죽염을 투여한 후 7일간 위장장애 유발 과정을 시행하였다 . Exp. B의 공시험군은 saline만을 12일간 투여하였다

3) 위장 손상 정도의 측정

실험동물을 단두도살하고 정중선을 따라 개복한 후 대만부를 따라 절개하여 빙냉 생리식염수에 세척하였으며 위장 손상은 수종 , 발적 , 혈흔 , 미란 , 부종등 손상 부위의 크기를 확대경을 사용하여 측정하고 길이를 잰 후 면적으로 환산 , 비교 산출 하였다 .

효소원의 제조

실험동물을 마취 개복한 후 위를 적출 , 절개하여 내용물을 제거하고 빙냉 생리 식염수로 세척 , 여지로 압박, 이물질을 제거한 후 냉소의 빙판 위에서 가위로 세절하고 조직 1g당 4배량의 0.1M KP buffer(potassium phosphate buffer pH 7.4)를 가하여 빙냉 상태에서 glass teflon homogenizer로 마쇄하였다 . 이 마쇄 균질액을 600g 에서 10분간 원심분리하여 핵 및 미마쇄 부분을 제거한 다음 10,000g에서 20분간 원 심분리하여 mitocondrial fraction을 얻고 SOD 활성 측정시료로 하였으며 이것을 15,000g에서 1시간 동안 초원심 분리하여 상징액을 얻은 후 GPx, GR 활성 측정원으로 사용하였다 . 상기의 모든 조작은 0∼4 에서 실시하였다 .

효소활성의 측정

1) Superoxide dismutase(SOD)의 활성측정

Superoxide dismutase 활성측정은 Martin의 방법에 준하여 실시하였다 . 효소원 제조 방법에 따라 분리된 cytosolic fraction에 EtOH-CHCl3 (5:3) 혼액 0.4배 량을 가하여 잘 혼합한 다음 10,000 g에서 20분간 원심분리하여 상징액을 얻고 이것을 superoxide dismutase 활성측정 효소원으로 사용하였다 . 반응액은 50mM K.P.buffer(pH 7.5, EDTA 0.1mM 함유 ) 일정량에 5mM hematoxylin 효소액의 용량을 달리하여 첨가하고 최종 반응액이 3.0ml가 되게 하였다 . 이 반응액을 25 에서 5분간 반응시킨 다음 550nm에서 흡광도의 변화를 측정하여 효소활성을 산정하였다 .

효소활성의 unit는 효소를 넣지 않고 반응시킨 5mM hematoxylin액의 흡광도 증가를 50% 억제하는 단백질의 양으로 산정하였다 .

2) Glutathione peroxidase(GPx)의 활성측정

Glutathione peroxidase의 활성측정은 Paglia등의 방법에 준하여 일정량의 0.1MTris-HCl buffer(pH 7.2)용액에 기질인 H2 O2 , 1mM GSH, 0.2mM NADPH 및 효소원 을 첨가하여 25, 5분간 반응시키는 동안에 생성되는 산화형 Glutathione(GSSG)를 환원시키는데 소비된 NADPH의 함량을 340nm에서 측정하여 그 활성을 산정하였다 . 효소의 활성은 1분당 1mg의 단백질이 산화시킨 NADPH의 양을 nmole로 나타내었다 .

3) Glutathione reductase(GR)의 활성 측정

Glutathione reductase의 활성측정은 Meiz와 Langdon의 방법 64) 에 준하여 27mM EDTA-Na와 16.3mM GSSG이 함유된 0.1M Tris HCl buffer(pH 8.0)용액 일정량에 6mM NADPH를 기질로 하여 효소액을 가한 후 25 에서 5분간 반응시키는 동안에 GSH를 생성시키는데 소비된 NADPH의 함량을 340nm에서 측정하여 그 활성을 산정 하였다 . 효소의 활성은 1분당 1mg의 단백질이 산화시킨 NADPH의 양을 nmole로 나타내었다 .

Glutathione의 함량측정

위장조직 중 Glutathione(GSH)의 함량측정은 Griffith의 방법에 준하여 조직마쇄액 일정량에 4% Sulfosalicylic acid를 가하여 제단백한 후 얻은 상징액 일정량에 5.5 ' -dithiobis, 2-nitro benzoic acid, 3mM NADPH, 50 units glutathione reductase를 함유한 0.1mM sodium phosphate buffer (pH7.5) 일정량을 넣고 반응시켜 생성된 p-nitrothiophenol의 흡광도를 파장 412nm에서 측정하여 농도를 산정하였다 . GSH함 량은 조직 1g당 함유되어 있는 GSH의 양을 μ mole로 나타내었다 .

Protein의 정량

단백질의 정량은 Lowry등의 방법 66) 에 준하여 bovine serum albumin을 표준품으로 하여 행하였다. 실험결과의 유의성 검증은 student's t-test를 이용하여 상호 비교하였다 .

실험결과

마늘 -죽염이 위장장애 유발쥐의 위장 손상도에 미치는 영향

마늘 -죽염 혼합제제의 수성 현탁액을 alcohol-salicylate로 7일간 위장장애를 유발한 동물 모델에게 5∼7일간 투여하였다 . 위 손상 후 마늘-죽염 혼합제제를 투여하여 마늘 -죽염 혼합제제의 위장장애에 미치는 영향을 관찰한 Exp. A의 Treatment 1(Fig.1)과 마늘 -죽염 투여와 위장장애 유발처치를 동시에 실시하여

마늘 -죽염제제의 위 손상 방어효과에 미치는 영향을 관찰한 Exp. B의 Treatment 2 및 마늘 -죽염 투여후 위장장애 유발 처치를 실시하여 마늘 -죽염 제제의 위 손상 예방효과에 미치는 영향을 관찰한 Exp. B의 Treatment 3(Fig. 2)은 모두 위장장애 유발군에 비해 수종 , 미란 , 발적 , 혈흔 , 혈관팽대 , 궤양등의 손상이 감소하는 것을 관찰할 수 있었다 .

마늘 -죽염의 위장 장애에 대한 치료효과를 나타내는 Fig. 1에서 치료군인 C는 위장장애를 유발한 위 손상군인 B에 비해 현저히 위 손상 면적이 적고 맑은 분홍색이며 위내막이 비교적 건강한 모양을 하고 있었으며 출혈흔적도 적은데 비해 위 손상군은 상위면에 수종이 발생하고 창백한 자주 빛을 띤 데다

위벽이 얇고 위축되어 있거나 혹은 크게 부풀어 있었다 . 마늘 -죽염의 위장장애에 대한 방어효과와 예방효과를 나타내는 Fig. 2에서는 위손상군인 B에 비해 방어효과를 나타내는 C 및 예방효과를 나타내는 D는 B에 비해 유의성 있는 위 손상 감소 효과를 나타내었다 .

위장장애 유발 쥐에서 Superoxide dismutase 활성에 미치는 영향

Superoxide dismutase(SOD)는 체내의 대표적인 scavenging enzyme으로서 superoxide anion을 hydrogen peroxide( O2 - → H2 O2 )로 환원시키는 작용을 가지고 있다 . Exp. A의 경우 위장장애 유발군인 B에서는 4.829 unit/mg protein 으로 정상대조군 A의 6.797 에 비해 71.05%의 활성 감소를 나타내었으나 마늘 -죽염으로 치료시 6.813을 나타내어 정상으로 회복 되었으며 (Fig. 3)

위장장애 유발과 동시에 마늘 -죽염을 투여한 Treatment 2에서의 SOD 회복 효과는 정상군인 A값이 7.307 인데 비해 C의 6.907 unit/mg protein 과 같이 94.52%로 유의성 있게 회복되었다 (Fig. 4). 위장장애 유발 전 마늘 -죽염을 미리 투여한 Treatment 3군에서는 유의성이 나타나지 않았다 .

이 결과로 미루어 볼 때 위장장애 유발동물에 대한 마늘 -죽염의 치료 및 방어효과는 항산화효소인 SOD 활성을 회복시킴으로써 위 손상으로 감소된 위장점막의 방어기능을 회복시켜 위장장애를 치료하는 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다 .

위장장애 모델에서 Glutathione 함량에 미치는 영향 .

Glutathione(GSH)은 체내에 존재하는 대표적인 해독 물질로서 GSH를 매개로 하는 항산화 효소들에 의해 독성물질을 제거하는 방어기구에 참여하고 있다 . Alc-salicylate로 위장장애를 유발한 동물모델에서 위장장애를 유발한 후 마늘 -죽염을 투여하여 치료 효과를 측정한 Treatment 1 의 경우 위장장애군에서 4.225μmoles/g tissue로 낮아진 GSH 함량이 C에서 5.200로 나타나 유의성있게 회복되었다 (Fig. 5).

한편 , 위장장애 유발과 동시에 마늘 -죽염을 투여한 Treatment 2군의 GSH함량은 4.139μmoles/g tissue에서 4.912μmoles/g tissue로 현저하게 회복되었고 , 위장장애 유발 전 마늘 -죽염을 미리 처리한 후 위장장애를 유발한 Treatment 3군은 위장장애군에서 낮아진 GSH 함량을 유의성있게 높이지는 못하였다 (Fig. 6). 따라서

마늘 -죽염 투여로 위장장애 상태를 치료 시키거나 방어할 수 있는 것으로 확인된 반면 마늘 -죽염을 미리 처리한 후 위장장애를 유발시켰을 때는 GSH 함량이 만족할 만큼 호전되기 어려운 것으로 나타났다 .

위장세포는 신생 속도가 빠르고 GSH는 미리 생산된 후 오래 저장되었다가 사용되는 것이 아니라는 점을 말해주는 실험 결과라 하겠다 .

위장장애 모델에서 glutathione peroxidase의 활성에 미치는 영향 .

Glutathione peroxidase(GPx)는 생체내에서 과산화수소와 과산화지질을 분해하는 효소로 GSH 의존성 free radical scavenging enzyme의 한 종류이다 . Exp. A의 정상대조군에 비해 alc-salicylate로 위장장애를 유발한 동물 모델에서는 GPx의 활성이 낮아져 있고 마늘 -죽염으로 5일간 치료한 Treatment 1군에서는 높아져 있으나 유의성을 볼 수 없었다 (Fig. 7).

한편 Exp. B의 정상 대조군이 37.967 n moles/mg protein/min인데 비해 위장장애군은 27.685 n moles/mg protein/min로 낮아져 있으며 , 위장장애 유발과 동시에 마늘 -죽염을 투여하여 방어 효과를 실험한 Treatment 2군의 C 및 마늘 -죽염을 미리 투여한 후 위장장애를 유발하여 예방효과를 특정한 Treatment 3의 D에서는 각각 35.807 n moles/mg protein/min 와 31.361 n moles/mg protein/min로 78.99%, 35.75%로 회복되어 위장장애 발생에 대항하는 방어효과를 유의성있게 나타내었다 (Fig. 8).

위장장애 모델에서 glutathione reductase의 활성에 미치는 영향

Gluththione reductase(GR)는 산화형 glutathione(GSSG)을 환원형 glutathione(GSH)로 전환 시키는데 관여하는 효소로서 독성물질을 제거하는 GSH의 생성을 촉진한다 .

위장장애를 유발한 후 마늘 -죽염을 투여한 Treatment 1군과 위장장애 유발과 동시에 마늘 -죽염을 투여한 Treatment 2군은 위장장애 유발로 인하여 낮아진 GR의 활성을 현저하게 회복시키는 것을 관찰할 수 있었다 (Fig. 9, 10). 즉 , Fig. 9의 정상군인 A가 48.891μmoles/mg protein/min 이었으나 위장장애군인 B가 34.630μmoles/mg protein/min 로 , 또 Fig. 10의 정상군인 A가 47.511 μ moles/mg protein/min 였으나 위장 장애군인 B가 30.697μmoles/mg protein/min로 낮아져 있는데 비해

마늘 -죽염을 투여하여 치료한 Treatment 1은 45.676 μ moles/mg protein/min로 93.32%, 마늘 -죽염 동시투여로 위장장애 방어효과를 본 Treatment 2인 C값은 43.647 μ moles/mg protein/min로 91.87%로 각각 증가하였다 . 이 실험 성적은 생체 방어기구 회복에 다각적으로 관여하는 GR 활성이 마늘 -죽염의 투여로 효과적으로 증진됨을 보여주었다 . 한편 , 위장장애 유발 전 미리 마늘 -죽염을 투여한 Treatment 3 군에서는 활성 값에 유의성이 없었다 .

고찰

소화기계 질환은 대부분의 국민이 경험을 갖고 있을 정도로 가장 광범위하고 대중적인 질병에 속한다 . 위장장애시 치료에 쓰이는 약물들은 전문의의 처방에 따른 약물 외에도 약사나 환자 및 주변 사람들의 권유나 판단에 의해 약물을 구입 , 복용하는 경우가 많아서 치료제로 적용되는 약물의 수효는 상당히 많을 것으로 생각된다.

현재까지 위산과다 위염 , 소화성궤양 치료제로 쓰이는 약물은 제산제 , 위점막 피복제, 항콜린제 , H2- 차단제, H+ -pump억제제와 H. pylori 에 대항하는 항균 , 항생제 등이 사용되고 있으나 부작용과 잦은 재발현상 등으로 임상욕구를 만족시키지는 못하고 있는 실정이며 더구나 잦은 재발은 위암의 발병에 중요한 원인을 제공하기도 한다 . 제산제의 사용은 위내의 적정산도 유지와 조절의 실패로 gastrin을 역으로 분비시키기도 하며 , 철분의 흡수를 방해하고 변비를 유발하기도하며 , 신장질환 환자에게는 약물배설의 어려움을 더욱 가중시킨다 .

항 콜린제 , H2- 차단제도 일정수준의 혈중농도 유지의 어려움 때문에 재발이 잦아 좋은 대책이 못되며 식사와 간식등 음식물 섭취 상태에 따라 매번 변하는 위내 환경 및 수면중의 위내 조건을 적절하게 조절 해야하는 어려움 등이 따른다 . 또 H+ -pump억제제는 장기간 사용시 오히려 약물자체의 발암성을 우려하여야 하며 H. pylori 살멸 또한 항생제나 항균제로 완전박멸치 못할 뿐만 아니라 설사 , 균교대증 등 장기치료 시에 어려움이 있으며 H. pylori 는 점액층과 상피세포간 접합부에 정착해 있기 때문에 활성산소 생산세포인 식세포가 위점막 고유판에 중무장 한 채로 수 십 년간 머무르는 상황이 발생하며 잠복한 이들 나선균의 재출현을 완벽하게 제어하지 못하는 등 문제점을 안고 있다

한편 , 민의약 혹은 대체 의학으로도 불리는 분야에서는 소화기계 질환치료제로 고미 건위약 , 방향성 건위제, 계내금 , 익모초 , 무화과 , 매실 , 반하 , 석수어염반 환 , 구운밭마늘과 죽염 혼합사용 등이 권장되고 있으며 구운밭마늘 -죽염 혼합요법은 임상적으로 상당한 효과를 나타내고 있어서 이 식품 의약의 효능을 규명하고자 alc-NSAID(salicylate)를 사용 , 위장장애 동물모델을 만들고 free radical scavenging enzyme을 중심으로 활성변화를 관찰한 결과 , 마늘 -죽염이 위장 손상을 방지하고 , 대표적인 free radical scavenging enzyme인 SOD의 활성을 높이며 , 해독 작용을 나타내는 생체의 방어기전인 GSH의 함량을 높이는 것은 물론 GSH 의존성 항산화 효소들인 GPx, GR의 활성을 유의성있게 회복시킴으로써 위점막의 방어기전에 기여하는 것으로 나타났다 . Free radical은 인체내에서 일상적으로 만들어지며 대부분 질병상태에서 free radical 생성속도가 증가된다 . Free radical에 의한 조직손상 기작은 상당히 밝혀져 있어서 항산화제의 치료목적 사용에 대한 논리적 근거를 제공하고 있다 .

SOD, GR, GPx, GSH 등 인체내에 존재하는 항산화제는 그 level을 높여줌으로써 조직을 보호하고 조직손상을 최소화하기 위해 치료목적으로 이용할 수 있을 것이다 . 최소한 항산화제 영양물질은 인체의 free radical 포집에 매우 중요하며 마늘과 죽염을 어떤 비율의 혼합제제로 함이 가장 적절한지 , 어느 정도량의 섭취가 타당한지는 아직 확언할 수 없다 . 시판되는 구운마늘가루:죽염 혼합비 2:1인 제제가 번용되고 있으나 다양한 용량과 혼합비를 섭취시켜보아 손상에서의 회복 정도를 측정하는 실험이 향후 있어야 하리라 본다 . 또 , free radical 제거능을 가지고 있다고 알려진 rebamipide와 같은

항궤양 치료용 약제와의 역가 동시비교는 xanthine dehydrogenase의 xanthine oxidase로의 형전환 억제능력이나 aldehyde oxidase 활성억제에 기인한 과산화지질의 감소 정도 등을 상호 비교할 필요가 있다고 보이며 , 부작용의 동시비교도 필요한 일이라 사료된다 .

또 , 마늘 -죽염의 위장장애에 대한 효과는 방어효과와 치료효과를 나타내며 위장 질환의 발병자체를 억제하는 효과가 더욱 큰 것으로 나타났다 . 위점막의 빠른 세포신생과 짧은 점막세포의 수명을 감안하면 위장 점막의 방어기전이 손상되기 전에 마늘 -죽염이 공급되어 방어기전의 유지를 가능케 하는 것이 좋은 대응법이라 사료된다 .

죽염은 수용액의 pH가 10부근으로 알카리성이며 생체에 유용한 금속원소를 골고루 가지고 있고 따라서 각종 보조효소의 활성화가 예상된다는 점 . 마늘자체가 살균작용을 나타낸다는 점 . 마늘 -죽염이 모두 독성이나 부작용이 거의 없다는 점을 감안하면 새로운 제제로서의 개발가능성이 높은 것으로 사료된다 .

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인산죽염의 H. pylori에 대한 임상연구

의식상승 — Tue, 01 Dec 2009 04:00:10 +0900

인산죽염의 효능에 대한 연구보고서

연구과제 : 인산죽염의 H. pylori 에 대한 임상연구

(제1차년도 연구 중간결과 보고서) 2001년 5월 31일

영남대학교 이과대학 생화학과 ㈜ 바이오즈

연구책임자 이학박사 류 효 익

제목 : 인산죽염의 H. pylori에 대한 임상연구

연구자 : 류효익, 방준호, 김영희

영남대학교 이과대학 생화학과, 대구 가톨릭 대학교 보건과학 대학원, ㈜ 인산가 인산생명과학 연구소

Ⅰ . 서론

소금은 인간 생존에 필수적인 영양물질이다. 고대 생식생활에서는 별도의 염분섭취가 필요없던 것이 농경사회의 도래와 음식물 조리습관이 생기면서부터 소금을 얻기 위한 노력이 시작되었다고 한다.

현재 소금의 종류는 천일염, 암염, 정제염 등으로 나누어지며 정제염은 기계염과 가공염 두 종류로 분류된다. 기계염은 이온교환을 통한 염화 나트륨 만의 시약용 소금이며 가공염은 태운소금 또는 죽염 등이 여기에 속한다.

죽염은 1980년 김 일훈 선생이 한문으로 서술한 그의 저서 “우주와 신약 ”에서 구운 소금의 제조 방법을 발표하고 “죽염 ”이라 명명하였으며 1986년 그의 저서 “신약 ”을 통해 이 제조방법을 쉽게 한글로 다시 발표한 후 널리 제조, 사용되기 시작하였으며 현재는 다소 변형, 응용하여 제조된 죽염도 있으나 모두 김 일훈 선생의 제조 방법과 같은 범주에 속한 것으로 보인다

죽염은 일반 소금과는 달리 인체에 필요한 무기질을 풍부하게 함유하고 있으며 여러 가지 질환에 효과가 있는 것으로 알려져 있는데 이와 관련하여 위염, 위궤양, 소화기계통의 질환에 대한 치료 효과 와 외상치료, 해독작용, 풍치, 치통에 대한 완화 효과가 보고 되었다. 또한 죽염을 혼합한 치약이 구강 내 연쇄상구균의 수를 감소시키고, 치은염의 증상을 완화 시킨다는 실험결과도 발표되었다. 특히 김일훈 선생의 방법으로 제조된 인산죽염은 지난 수 십년 간 각종 질병의 예방과 치료에 그 안전성과 약리적 효능 및 임상 효과가 체험을 통하여 이미 증명된바 있으며 또한 최근의 실험 동물을 이용한 과학적 연구결과도 그의 안전성과 약리적 효능 및 효과를 뒷받침하고 있다.

본 연구에서는 임상연구 자원자를 모집하여 8주간 각 자원자 당 하루 평균 10~15 그람의 인산죽염을 섭취하게 하여 매일 일정시간에 혈압을 측정하고, 매 2주 또는 4주마다 채혈하여 혈청에서 위염의 원인균으로 알려진 Helicobacter pylori (H. pylori)에 대한 혈중IgG 항체를 immunoassay로 측정하고 항체검사에서 양성으로 판명된 자원자들은 13C-Urea Breath Test (UBT)를 이용하여 위벽에 생존하고 있는 H. pylori균의 urease activity를 측정함으로써 죽염의 대표적인 효능으로 알려진 위염치료의 효능을 검토하였다.

II. 재료 및 방법

만성위염 , 위궤양, 십이지궤양, 위암 등을 유발하는 세균으로 알려진 H. pylori 감염진단을 위하여 혈청 속에 있는 H. pylori에 대한 IgG항체의 정량과 위벽에 현존하는 이 균의 urease작용을 측정하였다. 혈청 속에 있는 H. pylori에 대한 IgG항체의 정량은 면역측정법을 (Enzyme Immunoassay, EIA) 이용하였다.

먼저 혈청 (serum) 50㎕을 400㎕assay buffer (pH. 7.7) 와 희석하여 37 ℃ 에서 18분간 microtiter plate에 부착한 세척단계를 거치고 2차 항체로 hydrogen peroxidase-labeled goat anti-human IgG를 넣어 배양한 다음 다시 세척단계를 거처 tetramethylbenzidine (TMB; 기질용액) 를 넣어 37℃ 15분간 배양시켰다.

Anti-H. pylori IgG항체의 양은 COBAS CORE Ⅱ (Roche, Switzerland) 자동분석기를 이용하여 450 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 혈중 항체량과는 달리 살아 있는 H. pylori 균의 urease에 의해 분해된 urea양의 측정은 13C-Urea Breath Test (HELIKIT: Isotechnica Inc., Canada)를 이용하였다.

13C-urea 투여 전 4 시간 이상을 금식하고 녹색마개 시험관에 4초간 평상시의 호흡으로 날숨을 불어넣고 즉시 마개를 한 후 13C-urea 분말이 든 용기에 물 75 ml를 첨가 후 용해 시키고 이 용액 전량을 복용하였다. 복용 30분 후 황색마개 시험관에 4초간 평상시의 호흡으로 날숨을 불어넣고 즉시 마개를 하여 동위원소 질량분석기로 13C-urea/12C-urea 비율을 측정하였다.

인산죽염 섭취가 H. pylori 감염에 미치는 영향을 검토하기 위하여 혈중 anti-H. pylori IgG titer의 항체량 변화와 이 균의 urease 활성도를 13C-Urea Breath Test (UBT)로 검사하였다. 자원자 A, J, K, L, M과 N은 항체반응에 음성으로 판명되었고, B, D, E, F, G, H와 I는 양성으로 판명되었다 (TABLE 2).

또한 8주간의 인산죽염 섭취에 의한 양성반응 자원자의 혈중 항체량의 변화는 없는 것으로 나타났으며, 항체반응에 양성으로 판명된 자원자들은 모두 UBT에도 양성반응을 보였다 (TABLE 3). 흥미로운 사실은 자원자 E와 O의 UBT수치이다.

자원자 E는 지난 1년 이상 하루 평균 10 그람의 인산죽염을 섭취하였는데 혈중 H. pylori 항체량은 849.7 IU로 다른 양성반응 자원자의 항체량 보다 월등하게 높았으나 UBT는 제일 낮았다. 또한 비슷한 결과가 본 연구에는 참여하지는 않았으나 H. pylori 감염 검사에 참여한 자원자 O의 혈중 항체량 및 UBT 결과에서도 나타났다. 자원자 O는 지난 3년 하루 평균 10 그람 이상의 인산죽염을 섭취하였다고 하는데 그의 혈중 항체량은 245.7 IU로 높은 수치를 나타내고 있으나, UBT수치는 7.64로 거의 음성 5.0에 가깝게 나타났다.

이 두 결과는 인산죽염을 장기간 섭취하였을 경우 혈중 H. pylori균에 대한 항체량은 줄이지 못하였으나 위벽에 생존하는 H. pylori균의 수를 줄이는데 인산죽염이 효과가 있다는 것을 나타낸다.

Table 1. Age, gender and general health condition of volunteers participated in this experiment

Volunteer

Age

Gender

General health condition

Male

Hypertension (?), Liver (?)

Male

Normal

Female

No data

Male

Normal

Male

Hypertension (?)

Male

Liver (?)

Male

Normal

Male

Normal

Male

Normal

Male

Normal

Male

Normal

Male

Normal

Female

Normal

Male

Normal

Table 2. Effect of average 10 (Group I), 15 (Group II), or 7.5 to 30 gram (Volunter F) daily consumption of Insan Jukyom on the amount of anti-Helicobacter pylori IgG in the sera of the volunteers. Negative value of the antibody titer <10 IU/ml)

Day

Group I volunteer (10 g/day)

Self

"죽염혼합물이 Streptococcus mutans의 성장 및 산 생성에 미치는 영향" 자료입니다.

의식상승 — Tue, 01 Dec 2009 03:55:44 +0900

Journal of Korean Research Association for Purple Bammboo Salt Vol. 1. No.1.( 49～55 ) 2003 죽염혼합물이 Streptococcus mutans의 성장 및 산 생성에 미치는 영향 유용욱, 유현희 원광대학교 치과대학 구강생화학교실 Effects of Bamboo Salt and Bamboo Salt Mixture on the growth, acid production of Streptococcus mutans Yong-Ouk You, Hyeon-Hee Yu Department of Oral Biochemistry, School of Dentistry, Wonkwang University, Iksan, 570-749 Abstract We studied the inhibitory effect of the bamboo salt mixtures (Bams) on the growth and acid production of Streptococcus mutans (S. mutans). The growth of S. mutans was reduced by the presence of the Bam A (1mg/ml), Bam B (1mg/ml), Bam C (1mg/ml), and NaCl (1mg/ml) significantly [숨은설명:시작] Matsumoto M, Minami T, Sasaki H, Sobue S, Hamada S, Ooshima T. Inhibitory effects of oolong tea extract on caries-inducing properties of mutans streptococci. Caries Res. 1999;33(6):441-5. [숨은설명:끝] , and the positive control group (1% of NaF) also exhibited antibacterial activity. However, the bamboo salt alone did not exhibit antibacterial activity significantly. The decrease of pH was significantly inhibited in the presence of Bam A (1mg/ml), Bam B (1mg/ml), and Bam C (1mg/ml) compared to the control group [숨은설명:시작] 박사논문-cell proliferation [숨은설명:끝] . The decrease of pH was also inhibited in the presence of positive control group (1% of NaF), but the Bamboo salt alone did not demonstrate the inhibitory activity. These results suggest that Bams may have inhibitory effect on the growth and acid production of S. mutans Keywords : bamboo salt; bamboo salt mixture; Streptococcus mutans ♯To whom all correspondence should be addressed Tel: 82-63-850-6926 Fax:82-63-850-7313 E-mail:hope7788@wonkwang.ac.kr 치아우식증은 치과영역에서 가장 흔한 만성질환으로 알려져 있다. 치아우식증은 법랑질, 백악질, 상아질등과 같은 아의 경조직이 점차 비가역적으로 파괴되는 질환으로서 일반적으로는 충치라고 알려져 있다(1). 치아우식증은 전 세계적으로 널리 만연된, 사람이 치아를 사람이 치아를 상실하는 대표적인 원인질환으로서 당섭취 증가와 평균수명이 늘어남에 따라 발생이 증가하는 추세이므로 그 효과적인 관리대책이 절실히 요구되고 있다(2-4). 치아우식증의 주된 원인은 치면세균막에 의하여 유발되는데, 치면세균막에는 많은 함량의 미생물이 존재하는 것으로 알려져 있다. 치면세균막내 미생물은 당질을 대사하여 유기산을 형성함으로 치아의 경조직을 파괴하는 것으로 보고된 바 있다. 치아우식증은 전 세계적으로 널리 만연된, Streptococcus mutans (S. mutans)는 치면세균막형성에 가장 중요한 역할을 하는 원인균으로 알려져 있으며, S. mutans는 치아우식을 일으키는 주요 원인균으로 주목받고 있다(5,6). S. mutans는 G(+) 통성 혐기성세균으로 구강내의 치면세균막에 상주하여 섭취한 음식물에 포함된 탄수화물, 특히 포도당, 과당 등을 분해하고 그 대사과정에서 발생하는 부산물인 유기산 주로 젖산을 세포외로 방출함으로써 치아 법랑질을 탈회시킨다(7). 치아우식증 예방을 위해 치면세균막 형성의 원인균을 퇴치에 penicillin과 erythromycin 같은 항생제가 효과적인 역할을 하는 것으로 보고된 바 있지만, 장기간의 사용시 항생제에 대한 내성이 발생하므로 인해 임상에서 사용되지 못하고 있다(8). 또한 불소 화합물의 이용법(9-11)도 치면세균막 형성 억제에 쓰이고 있으나, 80 ppm이상의 농도로 사용시 세포독성을 나타내는 것으로 알려져 있다(12). 그 외 몇몇 구강세정제 등이 치아우식예방을 위한 약제로 개발되어 왔으나(13), 아직까지도 치아우식증이 주요한 치아상실의 원인으로 부각되는 것은 이러한 약제들이 충분한 효과를 거두지 못하고 있다는 증거이다. 따라서 보다 효과적이고, 실용적이며, 안정성이 있는 치아우식증 예방제의 개발이 요구되고 있는 실정이다. 지금까지의 연구에 따르면 몇몇 천연물이 치아우식증 예방에 효과가 있는 것으로 밝혀져 있다. 죽염은 치아우식증 예방에 효과적인 천연물로 전통의학에서 널리 사용되어 왔고, 현재에도 세치제 및 구강세정제로 사용되고 있는 형편이다. 또한 송진, 죽엽, 프로폴리스 및 자이리톨도 구강질환 예방제로 쓰여왔다. 따라서 본 연구에서는 죽염 및 송진, 죽엽, 프로폴리스 또는 자이리톨이 함유된 죽염혼합물이 S, mutans의 성장 및 산생성 억제에 미치는 효과를 관찰하여, 전통의학에서 치아우식증 예방에 사용되어온 죽염 및 죽염복합물의 효능을 과학적으로 입증하고, 더 나아가서 치아우식증에 예방에 사용되고 있는 기존의 방법을 보완할 수 있는 치아우식증 예방제를 개발시도 하고자 한다. 실험재료 및 방법 균주 및 배양 본 실험에 사용한 균주인 Streptococcus mutans ATCC 10449로, Brain heart infusion (Difco, USA)액체배지에 1-2차 계대배양 후 같은 배지에 식균하여 37℃의 항온기에서 24시간 배양하여 사용하였으며, 각 균주 배양액의 탁도를 탁도0.5관 (McFarland 0.5)으로 맞춘 다음 사용하였다. 죽염혼합물의 준비 효과적으로 항균 활성을 나타내는 죽염혼합물을 탐색하기 위하여 송진, 죽엽, 프로폴리스 또는 자이리톨을 이용하여 죽염혼합물 A, B, C를 제조하였다. 죽염혼합물 A의 조성은 죽염 55%, 송진 35% 및 자이리톨 10%가 함유되었고, 죽염혼합물 B의 조성은 죽염 66.7%, 송진 33.2% 및 죽엽 0.1%가 함유되었으며, 죽염혼합물 C의 조성은 죽염 55%, 송진 35%, 자이리톨 14% 및 프로폴리스 1%가 함유되었다. 항균 활성 측정 죽염 및 죽염혼합물 등의 항균 활성을 관찰하기 위하여 BHI 액체배지(1% Glucose 함유)에 죽염 및 죽염 혼합물, NaCl, 등을 1 mg/ml의 농도로 각각 첨가한 후 시험관에 0.95ml씩 분주한 다음 S. mutans를 0.05 ml 넣은 후, 37oC incubator에서 24시간 배양한 후 spectrophotometer로 550nm에서 흡광도를 측정하였다. 또한, 세균 배양액을 연속희석하여 MSBA 고체배지에 도말한 후 37oC incubator에서 48시간 배양후 colony forming unit(CFU)를 계산하였다. 이때 1% NaF를 양성 대조군으로 사용하였다. 산 생성량 측정 죽염 및 죽염혼합물 등의 항균 활성을 관찰하기 위하여 BHI 액체배지(1% Glucose 함유)에 1 mg/ml의 농도로 각각 첨가한 후 시험관에 0.95ml씩 분주한 다음 S. mutans를 0.05 ml 넣은 후, 37oC incubator에서 24시간 배양한 후, pH meter를 이용하여 pH를 측정하였다. 실 험 결 과 죽염 및 죽염혼합물의 항균활성 죽염 및 죽염혼합물의 항균 활성을 관찰하기 위하여 BHI 액체배지(1% Glucose 함유)에 각 시료를 1mg/ml의 농도로 각각 첨가한 후 24시간 배양하여, 흡광도를 측정한 결과, 죽염혼합물 A, B, C, NaCl, NaF는 대조군에 비해 유의적인 차이를 보였고(p<0.01～0.001), 죽염은 유의적인 차이를 나타내지 않았다. 측정된 OD값은 대조군에 대한 상대 성장률로 산정한 결과 죽염 99.30%, 식염 61.97%인 반면 죽염혼합물 A, B, C는 각각 5.21%, 2.16%, 9.51%로 S. mutans의 성장을 현저하게 억제되었다(Table 1). Table 1. Effect of bamboo salt mixture on optical density of S. mutans ODa % of controlControl0.59±0.007 A (1mg/ml)0.03±0.006**C 5.21±1.12**B (1mg/ml)0.01±0.02** 2.16±3.05**C (1mg/ml)0.06±0.005** 9.51±3.13**Bamboo salt (1mg/ml)0.58±0.006 99.30±1.00NaCl (1mg/ml)0.36±0.007* 61.97±1.39*1% NaF0.004±0.005** 0.70±0.78**aOptical Density at 540 nm, Values are expressed as the mean±SD, (n=10). *p<0.01 Significantly different from control group by t-test **p<0.001 Significantly different from control group by t-test MSBA 고체배지에 도말한 후 37oC incubator에서 48시간 배양후 colony forming unit를 계산한 후, 대조군에 대한 상대 성장률로 산정한 결과, Table 1과 마찬가지로 죽염혼합물 A, B, C의 1mg/ml 농도에서 S. mutans의 성장 억제 효과가 현저하였다(Table 2). Table 2. Effect of bamboo salt mixture on colony forming unit of S. mutans CFUa % of ControlControl1.60×108±0.26A (1mg/ml) 0±0.00* 0±0.00*B (1mg/ml) 0±0.00* 0±0.00*C (1mg/ml) 0±0.00* 0±0.00*Bamboo salt (1mg/ml)1.44×107±0.08* 8.99±0.55*NaCl (1mg/ml)1.03×105±3.42* 0.06±0.02*1% NaF2.20×10±8.16* 0.01±0.00005*aColony forming unit, Values are expressed as the mean±SD, (n=10). *p<0.001 Significantly different from control group by t-test 죽염 및 죽염혼합물의 산생성 억제효과 S. mutans에 의해 생성되는 유기산은 치아우식증에 직 접적인 영향을 미치는 중요한 요인이다. Table 3의 결과를 보면 죽염혼합물 A, B, C 및 양성대조군인 NaF처리군에서 S. mutans의 산 생성이 유의적으로 억제됨을 알 수 있었다. 그러나 NaCl 및 죽염 처리군에서는 산생성 억제효과가 나타나지 않았다. Table 3. Effect of bamboo salt mixture on acid production by S. mutans SamplepHaControl3.98±0.09A (1mg/ml)7.14±0.06*B (1mg/ml)7.15±0.06*C (1mg/ml)7.11±0.07*Bamboo salt (1mg/ml)3.94±0.10NaCl (1mg/ml)3.96±0.111% NaF7.03±0.02*aValues are expressed as the mean±SD, (n=10). *p<0.001 Significantly different from control group by t-test 고 찰 치아우식증은 구강 내에 생존하는 200여종의 미생물 중 S. mutans를 비롯한 구강질환 유발균들이 생성하는 불용성글루칸과 미생물들 그리고 음식물 잔사등이 서로 엉켜, 치면에 치태라고 하는 치면세균막을 형성하고 이들 미생물들의 대사산물인 각종 산에 의해 구강내 pH를 5.5이하로 낮추어 치아의 법질층의 무기질 성분들이 탈회되어 발생하는 질환이다2). 1980년대 중반부터는 전통약제나 식물 등에서 치아우식을 억제하는 효과를 밝히려는 일련의 시도들이 있어 왔다. 이에 본 연구에서는 죽염 및 송진, 죽엽, 프로폴리스 또는 자이리톨이 함유된 죽염혼합물의 S. mutans에 대한 성장과 산 생성 억제 효과를 측정하였다. 그 결과를 보면 A(죽염:송진:자이리톨=55:35:10), B(죽염:송진:죽엽=66.7:33.2:0.1), C(죽염:송진:자이리톨:프로폴리스=55:35:14:1), 죽염, NaCl 각 시료를 1mg/ml의 농도로 각각 첨가한 후, S. mutans를 24시간 배양하여, 흡광도를 측정한 결과, A, B, C는 대조군에 비해 각각 5.21%, 2.16%, 9.51%의 상대 성장률을 보여, S. mutans의 성장을 현저하게 낮추었다(p<0.01). 반면, 죽염은 99.30%, 식염은 61.97%였다. 그리고, MSBA 고체배지에 도말한 후 48시간 배양 후 colony forming unit를 계산한 결과에서도 A, B, C는 1mg/ml 농도에서 S. mutans의 성장이 완전히 억제 되었으며(p<0.001), 식염과 죽염은 각각 8.99%, 0.06%의 상대 성장률을 보였다. 일반적으로 미생물 배양시 각 미생물은 탄소원을 자화하여 성장에 필요한 에너지와 중간대사산물로 이용한다. 이 과정에서 유기산이라는 노폐물이 축적되어 배지의 수소이온농도를 증가시키고 즉 pH를 떨어뜨린다(2). 특히 S. mutans에 의해 생성되는 유기산은 치아우식증에 직접적인 영향을 미치는 중요한 요인인데, 대조군에서 pH는 3.98인 반면, 죽염혼합물 A, B, C 첨가군에서 각각 7.14, 7.15, 7.11로 나타나 S. mutans의 산 생성이 유의적으로 억제되었으며(p<0.001), 이것은 양성대조군인 1% NaF처리군의 7.03과 비슷한 결과였다. 이에 비해, 죽염과 식염은 각각 3.94, 3.96으로 나타났다. 즉, 죽염혼합물첨가로 S. mutans의 성장 뿐만 아니라 대사과정이 억제되어 산 생성량이 감소된 것에 기인한 것으로 보인다. 식염이 세균에 대해 증식을 억제하거나 살균 효과를 나타내는 것은 주로 삼투압의 작용에 의한 것이라고 볼 수 있다(14). Takada와 Fukushima(15)는 2% 식염 농도에서 다종의 S. mutans의 증식은 억제되었으나, 치태형성에 관여하는 효소인 glucosyltransferase activity는 균 종류에 따라 서로 다른 결과를 가져 왔다고 하였다. 정(16)은 자당 용액에 저농도(2.7%)의 식염을 첨가한 경우 S. mutans에 의한 자당발효에는 영향을 미치지 않았으나 증식을 상당히 억제 하였다고 하였다. 죽염은 식염(천일염)을 대나무 속에 넣어 고온으로 가열하여 태우기를 여덟 번 반복한 후, 마지막으로 아주 고온으로 녹여 흘러내린 것을 빻아서 제조한 일종의 가공식염으로서(14), 금속원소 중 K, Ca, Fe, Zn, Mn의 함량이 높을 뿐 아니라 알칼리성(pH 10) 물질이다(17). 이러한 죽염은 우리나라에만 특이하게 전해되어 오는 민간요법으로 구내염, 치통, 설암, 구강암 등 구강질환 치료와 위염, 위산과다, 위궤양, 위암, 축농중, 중이염 등 매우 다양한 질환의 치료에 이용되었다(16). 또한 구강내 세균증식을 억제시키며, 치태억제 및 치은염 감소에 효과가 있다(14,18-22)고 보고 되고 있으며, 허 등(17)은 마늘-죽염 제제가 위장 장애에 대한 방어효과와 치료효과를 나타내었다고 하였다. 그러나 양 등(23)은 실험동물에서 항암, 항고혈압 및 항당뇨 효과를 나타내지 않았으며, 김 등(24)은 항위궤양 효과를 기대하기 어렵다고 보고하였다. 죽염의 경우에는 균 증식을 억제함에 있어서 삼투압 이외에 제조과정에서 첨가된 무기이온의 상호작용 및 높은 pH도 상당한 역할을 하는 것으로 보고되고 있다(16). 그러나 본 연구에서는 식염과 죽염을 각각 단독으로 사용한 것에 비하여 송진, 죽엽, 자이리톨 및 프로폴리스를 혼합한 것이 월등히 효과가 좋은 것으로 나타나 이러한 물질의 상호작용에 의한 억제 효과가 있는 것으로 보인다. 송진은 소나무와 같은 속 식품의 줄기에서 나오는 진으로 많은 양의 수지산과 α-피텐, β-피넨, 캄펜과 같은 정유, 쓴맛 성분인 피니피크린, 탄닌, 비타민 등이 들어있다(25). 동의보감(26)에는 모든 악창(惡瘡), 두양(頭瘍), 백독(白禿), 개소(疥瘙)를 주로 치료하고 사기(死肌)를 없애며 귀가 먹은 것과 충치를 치료한다고 기록되어 있다. 의방유취(27)에는 벌레가 먹은것처럼 이가 삭아 구멍이 생기면서 아픈 것을 치료하는데 쓰이며, 동약법제, 북한동의보감에는 염증, 악창, 옴, 습진 등 외용약으로 사용하였다고 한다(25,28). 죽엽은 대나무의 잎을 가리키며 열내림, 피멎이약, 중풍, 고혈압 등에 민간 요법으로 사용되어 왔고(29), 살균 및 항진균 작용과 항암효과, 지질과산화물 억제, 전자공여능, 아질산염 제거능 등의 생리활성도 있는 것으로 알려지고 있다(30). 그러나 송진과 죽엽의 치아우식 및 치의학 분야에 대한 연구 보고는 미흡한 실정이다. 본 연구에 의하면 죽염, 송진, 죽엽의 혼합물이 다른 혼합물에 견주어 볼 때 그 효과가 떨어지지 않는 것으로 보아 추후 송진과, 죽엽 각각의 연구도 필요하리라 생각된다. 프로폴리스는 꿀벌이 식물로부터 수지(樹脂)를 수집하고 이를 저작(詛嚼)하는 동안 분비한 타액과 복부로부터 분비되는 beewax를 섞어 만드는 물질이다(31). Propolis용액은 S. mutans와 구강에서 분리한 다른 세균에 대해 항균효과를 나타내어 치아우식을 억제한다(32)고 연구되고 있다. 현재 북구와 동구권에서는 프로폴리스의 항균, 방부, 수렴, 정균, 진경, 소염, 마취효과 등 그 동안의 연구 결과에서 나타난 효과들을 이용하여 치약성분, 화장품, 건강식품 등으로 광범위하게 이용하고 있다(33,34). 자이리톨은 식물에서 추출한 D-xylose를 수소화하여 생산하는 5탄당 알코올로, 자당과 같은 정도의 단맛을 내는 물질로서, 용해열이 커서 구강상쾌감을 나타낸다. 자이리톨은 40개국 이상에서 식품첨가 감미료나 미용제 또는 약제로 사용되고 있다(35). 구강내 세균에 대한 자이리톨 연구를 보면 이 등(36) [숨은설명:시작] 김윤정, p15 [숨은설명:끝] 은 S. mutans를 100 mM 자이리톨이 첨가된 BHI에 배양했을 때 균 성장은 포도당, 과당 또는 솔비톨을 첨가하고 배양했을 때에 비해 1/2정도 억제 되었고, 배양물의 pH 저하 등 자이리톨이 첨가된 BHI 배양액에서 가장 낮게 나타났으며 포도당과 함께 배양했어도 자이리톨이 첨가되면 균 성장과 pH 저하도 자이리톨의 영향으로 억제 되었다고 보고하였다. 또한 박(37)은 자이리톨(0.5%)이 S. mutans에 의해 8시간 동안에 우식임계 pH 5.5에 도달되지 않았으며, S. mutans의 성장을 저해하였다고 하였다. 또한 자이리톨과 불소의 복합작용, 자이리톨의 광질 이탈 억제작용, 자이리톨배합 구강환경관리용품 및 자이리톨배합껌의 효과에 관한 연구 보고 등이 있다(35,38-41). 본 연구에서는 24시간 후에도 죽염혼합물 A, B, C 첨가군에서 7.11～7.15로 나타나 우식임계 pH에 도달하지 않았으며, S. mutans의 성장을 저해하였다. 이상의 결과를 종합해 보면 죽염 단독으로 사용할 때보다 송진, 죽엽, 프로폴리스 및 자이리톨 혼합물은 치아우식균인 S. mutans의 성장과 산생성을 억제하는 것으로 나타났으며, 이는 치아우식증 및 치주염에 예방에 사용되고 있는 기존의 방법을 보완할 수 있는 치아우식증 및 치주염 예방제 개발가능성이 높은 것으로 생각된다. 참 고 문 헌 1. 김종배, 최유진, 백대일, 신승철 : 예방치학, 고문사, 서울 p. 1-199(1987). 2. 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죽염의 항염 활성연구

의식상승 — Tue, 01 Dec 2009 03:54:50 +0900

죽염의 항염 활성연구

자죽염을 함유한 금연보조제 시가 엑스에 관한 연구자료

의식상승 — Tue, 01 Dec 2009 03:54:21 +0900

자죽염을 함유한 금연보조제 시가 엑스에 관한 연구자료

죽염에 의한 즉시형 알레르기 반응의 억제

의식상승 — Tue, 01 Dec 2009 03:53:47 +0900

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죽염의 구강내 항균 및 살균 작용

의식상승 — Tue, 01 Dec 2009 03:52:43 +0900

죽염의 구강내 항균 및 살균 작용